miRNA（微RNA）是一种小型非编码RNA，在基因的转录后调控中起着重要的作用。miRNA影响各种生理过程和疾病，如癌症、心脏病、神经退行性疾病等。miRNA存在于细胞内，但也可以被包装在细胞外小泡（EV）如外泌体和微囊泡中，并在细胞外空间中被观察到。
miRNA被动态地排序到细胞外小泡中，其机制尚未完全阐明。然而，已经提出了一些解释miRNA如何被排序到EV的机制。
依赖序列基序的排序：
研究表明，如果miRNA存在特定的序列基序，那么它可能会诱导它们被包装到EV中。例如，miRNA的 ‘EXOmotifs’ 或 ‘GGAG’ 基序的存在，与选择性排入外泌体有关。
依赖miRNA诱导的沉默复合体（miRISC）的排序：
与诱导基因沉默的miRISC相关的miRNA可能被选择性地排序到EV中。这个复合体的一个组成部分AGO2蛋白在EV中是可见的。
miRNA诱导的沉默复合体（miRISC）是miRNA在细胞内发挥基因调控功能的机制。这个复合体包括与miRNA结合并导向目标mRNA的Argonaute（AGO）等蛋白。
关于与miRISC相关的miRNA如何被选择性地排序到EV的机制，尚有许多未知之处。然而，包括外泌体在内的EV中，被认为存在miRISC的组成部分，如AGO蛋白。与这些蛋白结合的miRNA可能被共同包封入EV。
这种现象是如何发生的，以及其精确的分子细节，仍在研究中。AGO2，miRISC的一个组成蛋白，在EV中的存在可能是在其中发挥作用。此外，还有一些证据表明miRISC与miRNA的结合可能影响其在细胞和细胞外环境间的分布，但这需要进一步的确认。
Gibbings, D. J., Ciaudo, C., Erhardt, M., & Voinnet, O. (2009). Multivesicular bodies associate with components of miRNA effector complexes and modulate miRNA activity. Nature cell biology, 11(9), 1143-1149.
请注意，由于miRNA和EV生物学领域正在快速发展，最新的研究可能会提供超越我在2021年9月的知识截止点的关于这些机制的更多见解。
依赖hnRNPs的排序：
hnRNPs是”异质核糖核蛋白”的英文缩写，全称是”Heterogeneous Nuclear Ribonucleoproteins”。
他们支持一系列RNA处理事件，特别是剪接、RNA的转运、mRNA的稳定性以及翻译的调节。
hnRNPs通常存在于细胞核中，但也可以移动到细胞质中。他们的功能主要通过与RNA的相互作用来调控。hnRNPs具有识别并结合特定RNA基序的能力，这使得特定的RNA分子能被送到特定的细胞内位置。
在miRNA的排序中，hnRNPs被认为与miRNAs结合，并将它们引导到细胞外小泡（EV）。特别地，hnRNPA2B1蛋白被认为识别miRNA的特定基序，并且可能通过Sumoylation（一种翻译后修饰）来使它们被排序到EV。
然而，关于hnRNPs和miRNA排序的关系还没有完全解明，需要进行更多的研究。
参考文献： Santangelo, L., Giurato, G., Cicchini, C., Montaldo, C., Mancone, C., Tarallo, R., … & Weisz, A. (2016). The RNA-Binding Protein SYNCRIP Is a Component of the Hepatocyte Exosomal Machinery Controlling MicroRNA Sorting. Cell reports, 17(3), 799-808.
依赖Sumoylated-HnRNPA2B1的排序：
Sumoylation（一种蛋白质的翻译后修饰）后的hnRNPA2B1蛋白也可能参与miRNA的排序。被Sumoylation的hnRNPA2B1能识别miRNA的特定基序，并将它们排序到EV。
Sumoylation（苏莫化）是一种化学改变，其中SUMO（Small Ubiquitin-like Modifier，小泛素样修饰子）蛋白质结合到另一种蛋白质上，影响蛋白质的各种功能。
具体的な变化如下：
- 蛋白质的激活或非激活: 当SUMO结合到蛋白质上时，可以增强或抑制蛋白质的活性。这适用于各种蛋白质，如酶，转录因子等。
- 蛋白质的定位: Sumoylation可能会改变蛋白质在细胞内的位置。例如，结合了SUMO的蛋白质可能更容易移动到细胞核。
- 蛋白质间的相互作用: 当SUMO结合到蛋白质上时，可以改变蛋白质与其他蛋白质的相互作用方式。这可以通过获得与新伙伴结合的能力，或者失去与现有伙伴结合的能力来实现。
- 蛋白质的稳定性: Sumoylation可能会影响蛋白质的稳定性，并可能延长或缩短其寿命。
通过上述影响，Sumoylation在调节细胞过程，如细胞分裂，DNA修复，转录控制，凋亡（程序性细胞死亡）等方面发挥重要作用。
参考文献： Villarroya-Beltri, C., Gutiérrez-Vázquez, C., Sánchez-Cabo, F., Pérez-Hernández, D., Vázquez, J., Martin-Cofreces, N., … & Falcón-Pérez, J. M. (2013). Sumoylated hnRNPA2B1 controls the sorting of miRNAs into exosomes through binding to specific motifs. Nature communications, 4(1), 1-10.
4E-T依赖的排序:
4E-T（EIF4E transporter）是一种RNA结合蛋白，它在调控RNA转录后的代谢和翻译方面发挥作用。
EIF4E是“真核翻译起始因子4E”的缩写，它是一种启动蛋白质翻译（将遗传信息转换为蛋白质的过程）的蛋白质。而4E-T负责运输EIF4E，并参与调节翻译。
具体来说，4E-T与EIF4E结合，作为其分子伴侣（chaperone）功能。这使得EIF4E可以准确地移动到所需的位置，并在适当的时机发挥其作用。
此外，4E-T还负责控制mRNA的选择性翻译。特别是在细胞应激下，4E-T控制特定应激反应蛋白质的mRNA的翻译。
更进一步，最近的研究表明，4E-T在调控微小囊泡（一种细胞外小囊）内miRNA的分类中发挥作用。这使得细胞可以控制哪些miRNA被包含在微小囊泡中。
参考文献： Kouhkan, F., Hafizi, M., Mobarra, N., Mossahebi-Mohammadi, M., Mohammadi, S., Behmanesh, M., … & Sattari, M. (2015). miRNAs: a new method for erythroid differentiation of hematopoietic stem cells without the presence of growth factors. Applied biochemistry and biotechnology, 175(2), 1134-1148.
分子伴侣（chaperone）是什么？
分子伴侣（chaperone）是一种帮助蛋白质获得适当三维结构（即正确折叠的状态）的蛋白质。如果蛋白质没有正确地折叠，其功能可能会受损，细胞可能会受到压力。
分子伴侣蛋白质不仅帮助新合成的蛋白质正确折叠，还帮助修复异常形状的蛋白质，或者帮助分解不能修复的蛋白质。这样，细胞可以保持蛋白质的质量。
此外，分子伴侣还涉及到蛋白质的运输。也就是说，它们有时扮演将蛋白质运送到细胞内特定位置的角色。在这种情况下，分子伴侣扮演“指导”的角色，确保蛋白质能够到达正确的位置。
参考文献： Hartl, F. U., Bracher, A., & Hayer-Hartl, M. (2011). Molecular chaperones in protein folding and proteostasis. Nature, 475(7356), 324-332.
